Методы очистки: применение сорбентов для гель-фильтрационной хроматографии в вирусных вакцинах

Хотя вирусы часто вызывают страх, достижения в области научных исследований позволили использовать вирусы, их компоненты или деактивированные вирусы для стимуляции иммунной системы человека к выработке специфических антител и иммунных клеток. Это привело к появлению концепции вирусных вакцин.

Разработка вирусных вакцин проходит тщательные научные исследования и клинические испытания для обеспечения их безопасности и эффективности. К распространённым вирусным вакцинам относятся вакцины против гриппа, бешенства, ветряной оспы, гепатита и пневмонии.

Процесс очистки вирусных вакцин

При изучении вирусов процесс очистки является важным этапом. Образцы вирусов высокой степени очистки позволяют проводить более детальные исследования, а передовые технологии разделения и очистки играют решающую роль в подготовке вирусных вакцин. Когда речь заходит о методах очистки вакцин, в первую очередь на ум приходят аффинная хроматография, ионообменная хроматография и гидрофобная хроматография. Однако гель-фильтрационная хроматография часто остаётся без внимания.

В этой статье мы сосредоточимся на применении гель-фильтрационной хроматографии для очистки вирусных вакцин. Гель-фильтрационная хроматография (GFC), также известная как хроматография по размеру (SEC), разделяет образцы по молекулярному весу, используя размер пор сферических частиц геля.

Схема гель-фильтрационной хроматографии

Chromstar® 4FF,  гель-фильтрационный хроматографический сорбент, обычно используется для очистки рекомбинантных белков, антител, нуклеиновых кислот, вирусов, вирусоподобных частиц и полисахаридов. Он показал отличные результаты при работе с вакцинами против гриппа: с одной стороны, он может удалять овальбумин из вакцин против гриппа на основе яиц; с другой стороны, он обеспечивает отличные результаты как по выходу HA, так и по степени удаления белка в вакцинах против гриппа на основе клеток.

Технические параметры

Название	Chromstar® 4FF
Тип сорбента	Гель-фильтрация
Матрица	Cross-linked Agarose, 4%
Диапазон размера частиц	45~165 μm
Диапазон разделения	Сферические молекулы: 60 kDa~20,000 kDa Линейные молекулы: 20 kDa~6,000 kDa
Рекомендуемый поток	90~200 cm/h*
Макс. поток	250 cm/h
Макс. обратное давление	0.3 MPa
Рабочая температура	4-30°C
pH стабильность**	2-14
Совместимые растворители	Common aqueous solutions, 30% isopropanol, 75% ethanol, 1M NaOH, 1M acetic acid, 6M guanidine hydrochloride, 8M urea

* При высоте слоя ≥ 60 см рекомендуется уменьшить скорость потока до 45–60 см/ч.
** Физико-химические свойства и функциональность хроматографической смолы остаются стабильными после 7 дней хранения при температуре 40°C и pH 2–14.

Пример применения

Очистка вакцины против вируса гриппа с помощью Chromstar® 4FF
Смола: Chromstar® 4FF
Колонка: Chrom-LinX® 16/700 (H=60 см)
Образец: вирус гриппа
Объем образца: 10 мл
Скорость потока: 6 мл/мин
Буфер: 10 мМ PBS

Цикл очистки	HA Коэффициент восстановления	Уровень удаления белка
Первый	96%	47%
Второй	92%	48%
Третий	91%	48%

Резюме: после трёх циклов очистки с использованием Chromstar® 4FF степень извлечения гиалуроновой кислоты стабильно превышала 90%, а степень удаления белка достигла 47%.

Каталожные артикулы

Название	Артикул	Спецификация
Chromstar® 4FF	1010-1121	25 mL
	1010-1122	100 mL
	1010-1123	500 mL
	1010-1124	1L
	1010-1125	5L
	1010-1126	10L
	1010-1127	20 L