Как выбрать подходящий хроматографический сорбент для биотехнологического процесса?
Поскольку гидрофобные характеристики целевого продукта напрямую получить сложно, при проектировании процесса гидрофобной хроматографии необходимо проводить предварительные эксперименты с наполнителями, содержащими различные гидрофобные лиганды. Гидрофобность гидрофобного лиганда бутил-октил-фенила последовательно увеличивается, а гидрофобность целевого продукта можно предсказать с помощью комбинированного теста на адсорбцию с различными гидрофобными наполнителями. После понимания гидрофобности целевого продукта следует провести предварительную обработку целевого продукта. Целевой продукт будет объединён с гидрофобным наполнителем в системе с высоким содержанием соли и элюирован в условиях с низким содержанием соли. Следовательно, необходимо оптимизировать концентрацию соли во время загрузки образца (в качестве соли для предварительной обработки при загрузке образца обычно выбирается сульфат аммония). Кроме того, после предварительного определения типа лиганда и концентрации соли, необходимой для загрузки образца, градиентное элюирование от высокого к низкому содержанию соли можно использовать для скрининга наполнителей и оптимизации процесса. Последующие действия могут быть дополнительно оптимизированы посредством экспериментального планирования.
Упаковка подходящих образцов для гидрофобной хроматографии
Гидрофобная хроматография белков — это хроматографический метод очистки, основанный на разнице гидрофобности целевого продукта и примесей. Главным образом, гидрофобная хроматография используется для удаления высокомолекулярных полимеров.
