Вакцинация всегда была одним из самых эффективных методов профилактики и борьбы с инфекционными заболеваниями. Вакцины играют все более важную роль в здравоохранении, а их безопасность постепенно выходит на первый плн. Хроматографическая очистка — надежный способ повысить эффективность вакцин и снизить вероятность побочных эффектов.
Хроматографический метод позволяет эффективно разделять, очищать и анализировать компоненты вакцин, обеспечивая соответствие конечного продукта строгим стандартам качества и безопасности.
Ионообменные сорбенты Biolink получают путем соединения функциональных групп ионообменных сорбентов с матрицей из агарозы высокой жесткости с помощью декстрана, что обеспечивает эффективную очистку белков за счет увеличения плотности лигандов и связывающей способности. Таким образом, на этапах улавливания или очистки целесообразно использовать ионообменные сорбенты (с частицами разного размера).
Примеси, молекулярная масса которых меньше определенного значения, могут проникать в гранулы и связываться с лигандами, в то время как целевые молекулы будут блокироваться. Таким образом, по сравнению с традиционными сорбентами смешанная хроматография обеспечивает больший объем загрузки образца, а также эффективное уменьшение объема колонки при масштабировании.
Чтобы добиться высокой степени очистки вакцины, на downstream этапах обработки необходимо выбрать подходящий метод хроматографии в зависимости от свойств антигена и сложности системы экспрессии. Кроме того, использование мембранной хроматографии может эффективно повысить иммуногенность и безопасность вакцин.
Технология очистки вакцин
К вакцинам относятся аттенуированные вакцины, вакцины-носители, инактивированные вакцины, полисахаридные вакцины, полипептидные вакцины, вакцины на основе нуклеиновых кислот, вакцины на основе вирусоподобных частиц и генно-инженерные субъединичные вакцины. Таким образом, требования и методы очистки могут сильно различаться в зависимости от типа вакцины. В целом процесс очистки вакцины включает в себя следующие этапы: выделение клеток, осветление, очистка, промежуточная очистка, финишная очистка, составление рецептуры и розлив.Хроматографические технологии, применяемые при очистке вакцин
Хроматографическая технология является ключевым этапом в процессах выделения, промежуточной очистки и доочистки. Хроматографическая технология включает в себя аффинную хроматографию, ионообменную хроматографию, хроматографию на основе гидрофобных взаимодействий и хроматографию в смешанном режиме. Поэтому на практике важно гибко подходить к выбору различных комбинаций хроматографических методов в соответствии с конкретными требованиями.Аффинная хроматография
Для аффинной хроматографии требуются поверхностные белки и белковые метки, которые могут специфически связываться с ионообменными смолами. Таким образом, этот метод можно применять для грубой очистки рекомбинантных белковых вакцин, при которой сорбент захватывает и концентрирует целевые биомолекулы.Ионообменная хроматография
Ионообменная хроматография играет важную роль на downstream этапах производства вакцин. Если говорить конкретнее, то проточная ионообменная хроматография позволяет эффективно удалять эндотоксины HCP, HCD и кишечной палочки, обладая такими преимуществами, как высокая связывающая способность и широкая область применения, что делает ионообменные сорбенты идеальным вариантом для очистки различных вакцин.Ионообменные сорбенты Biolink получают путем соединения функциональных групп ионообменных сорбентов с матрицей из агарозы высокой жесткости с помощью декстрана, что обеспечивает эффективную очистку белков за счет увеличения плотности лигандов и связывающей способности. Таким образом, на этапах улавливания или очистки целесообразно использовать ионообменные сорбенты (с частицами разного размера).
Хроматография на основе гидрофобного взаимодействия
HIC хроматография (хроматография на основе гидрофобного взаимодействия) позволяет обрабатывать большие объемы образцов, а также концентрировать и обессоливать их в режиме связывания и элюирования. Например, сорбенты HIC часто используются в процессе очистки вакцины против гепатита В, где гидрофобные связи белка HBsAg могут эффективно связываться с гидрофобными лигандами, оставляя несвязанными поверхностный белок и нуклеиновую кислоту, что позволяет получить поверхностный антиген высокой степени очистки путем элюирования.Эксклюзионная хроматография
По сравнению с обычными примесями, вирусы и векторные белки имеют больший размер частиц и более неравномерную молекулярную массу. Поэтому эксклюзионные сорбенты широко используются в производстве вакцин, особенно на стадии, где перед окончательной очисткой удаляются мелкомолекулярные примеси.Смешанная хроматография
Сорбенты для смешанной хроматографии обладают большим преимуществом при очистке вакцин благодаря различным силам взаимодействия, которые они обеспечивает. Двухслойная структура обычно состоит из сердцевины в виде микросфер (с анионообменной и гидрофобной функциями) и тонкой оболочки (с функцией ограничения по размеру).Примеси, молекулярная масса которых меньше определенного значения, могут проникать в гранулы и связываться с лигандами, в то время как целевые молекулы будут блокироваться. Таким образом, по сравнению с традиционными сорбентами смешанная хроматография обеспечивает больший объем загрузки образца, а также эффективное уменьшение объема колонки при масштабировании.
Чтобы добиться высокой степени очистки вакцины, на downstream этапах обработки необходимо выбрать подходящий метод хроматографии в зависимости от свойств антигена и сложности системы экспрессии. Кроме того, использование мембранной хроматографии может эффективно повысить иммуногенность и безопасность вакцин.
