Формирование правильной культуры: клеточной и производственной
Биопроцессы на основе клеточных культур особенно подвержены контаминации из-за использования питательных сред, частично открытых систем, чувствительных условий роста, частого взаимодействия с оборудованием и длительных периодов культивирования. Хорошая стратегия борьбы с контаминацией начинается с выявления источников загрязнения. К ним относятся все реагенты и добавки, используемые при приготовлении среды, оборудование, используемое в процессе культивирования клеток, и даже лабораторный воздух и вода. Далее, в нем определяются соответствующие стратегии смягчения последствий для предотвращения заражения или выявления его на ранней стадии. Ключом к этому является доступ к надежным решениям, разработанным с учетом требований, предъявляемых к каждому этапу технологического процесса.Быстрое тестирование на микробиологическое загрязнение
При культивировании клеток большое внимание уделяется защите клеточных линий от микробиологической контаминации. Загрязнение микоплазмами может нарушить экспрессию белков, рост клеток, а также синтез РНК и ДНК, что приводит к нестабильности биопродуктов. Регулярные проверки — это превентивная мера, позволяющая выявить заражение на ранней стадии, до того как оно станет системной проблемой. Распространенные методы тестирования делятся на две категории: экспресс-тесты и традиционные методы на основе культивирования. В последнем случае для полного исключения заражения может потребоваться до 28 дней, что в некоторых случаях слишком долго. Экспресс-тесты и аналитические наборы позволяют получить результаты за несколько часов.Удаление микоплазм с помощью стерильной фильтрации
Стерильная фильтрация — эффективный способ удаления микробных загрязнений, когда автоклавирование невозможно. Например, при приготовлении питательных сред из сухого порошка, поскольку под воздействием тепла могут разрушиться необходимые питательные вещества и кофакторы. Однако микоплазма может проникать через стандартные мембраны с размером пор 0,22 мкм, поэтому лучше всего использовать фильтр с размером пор 0,1 мкм.Низкая скорость потока — одна из самых распространенных проблем при фильтрации. Иногда можно успешно решить эту проблему за счет увеличения площади фильтрации, что значительно повышает ее эффективность. Кроме того, решения, позволяющие параллельно фильтровать несколько образцов, также повышают пропускную способность.
Мониторинг воздуха в GMP помещениях
Биотерапевтические препараты, которые проходят путь от разработки до клинических испытаний и коммерческого производства, должны полностью соответствовать требованиям надлежащей производственной практики, включая мониторинг окружающей среды в чистых помещениях и других контролируемых зонах. Устройства для отбора проб воздуха, используемые в рамках этих протоколов, улавливают частицы с помощью мембраны. Для точного подсчета микробные частицы должны оставаться жизнеспособными, но это невозможно, если мембрана высыхает. Этого можно добиться с помощью специальной мембраны: воздушные сканеры, в которых используются специальные желатиновые мембраны без агара, могут выдерживать высыхание в течение 8 часов активного отбора проб.Регулярная очистка оборудования
Базовое лабораторное оборудование также может стать источником загрязнения при культивировании клеток. Поддержание чистоты центрифуг, дозаторов, лабораторных весов и всего необходимого лабораторного оборудования — часть соблюдения правил асептики. Для переноса жидкостей важно использовать пипетки, которые легко мыть и которые оснащены подходящими стерильными наконечниками с фильтрами для поддержания стерильности. Современные весы оснащены интуитивно понятным программным обеспечением и пошаговыми инструкциями по очистке, которые помогают соблюдать требования к взвешиванию.Решения для рабочего процесса без загрязнений
Формирование всеобъемлющей культуры чистоты, охватывающей как клеточный уровень продукта, так и производственную среду, является не просто рекомендацией, а критическим требованием для получения достоверных результатов и безопасности биотерапевтических препаратов. Как показывает практика, даже незначительные, на первый взгляд, упущения могут привести к серьезным последствиям. В связи с этим, упор на превентивные меры, такие как строгий контроль сырья, обучение асептическим техникам и регулярный мониторинг воздуха с использованием специализированных желатиновых мембран, становится экономически и научно оправданным .
Внедрение технологических решений должно идти рука об руку с формированием ответственности у персонала . Ключевым выводом является переход от реактивной борьбы с последствиями к проактивному управлению рисками, что соответствует духу актуальных нормативных требований GMP . Только комплексный подход, объединяющий передовые методы детекции, эффективные технологии фильтрации и повседневную культуру чистоты на рабочем месте, способен гарантировать стабильность биопроцессов, сохранность клеточных линий и, в конечном итоге, качество и безопасность конечного продукта для конечного потребителя .
