Иммуноферментный анализ (ИФА)

На сегодняшний день одним из ключевых методов лабораторной диагностики является иммуноферментный анализ (ИФА). Этот метод позволяет качественно или количественно определять различные соединения, макромолекулы, вирусы и другие вещества в биологических образцах. В основе ИФА лежит специфическая реакция антиген-антитело.

Для регистрации сигнала в ИФА используется фермент в качестве метки. Этот метод широко применяется в диагностике онкомаркеров, гормонов, лекарственных препаратов в крови пациентов, а также для мониторинга лекарственных препаратов. Кроме того, ИФА используется для диагностики ВИЧ-инфекций, вирусных гепатитов, сифилиса, хламидиозов, микоплазмозов, TORCH-инфекций, хеликобактериоза, вирусов и антител против них и многих других заболеваний.

Ассортимент доступных наборов для диагностики человека

• HUMAN TIMP-1 ELISA KIT（EH021）
• HUMAN FGF Basic ELISA KIT（EH022）
• HUMAN IL-17 ELISA KIT（EH023）
• HUMAN IL-13 ELISA KIT（EH024）
• HUMAN β Amyloid Total ELISA KIT（EH025）
• HUMAN IL-22 ELISA KIT（EH027）
• HUMAN Lipocalin-2/NGAL ELISA KIT（EH028）
• HUMAN C-Reactive Protein (CRP) ELISA KIT（EH029）
• HUMAN Resistin ELISA KIT（EH030）
• HUMAN MMP-3 Total ELISA KIT（EH031）
• HUMAN Serpin E1/PAI-1 ELISA KIT（EH032）
• HUMAN MIF ELISA KIT（EH033）
• HUMAN IL-12/IL-23 p40 ELISA KIT（EH034）
• HUMAN IL-23 ELISA KIT（EH035）
• HUMAN Endostatin ELISA KIT（EH037）
• HUMAN CCL5/Rantes ELISA KIT（EH038）
• HUMAN β Amyloid 40 ELISA KIT（EH039）
• HUMAN β Amyloid 42 ELISA KIT（EH040）
• HUMAN IL-1β ELISA KIT（EH001）
• HUMAN IL-2 ELISA KIT（EH002）
• HUMAN IL-4 ELISA KIT（EH003）
• HUMAN IL-6 ELISA KIT（EH004）
• HUMAN IL-8 ELISA KIT（EH005）
• HUMAN IL-10 ELISA KIT（EH006）
• HUMAN IL-12p70 ELISA KIT（EH007）
• HUMAN IFN-γ ELISA KIT（EH008）
• HUMAN TNF-α ELISA KIT（EH009）
• HUMAN TGF-β1 ELISA KIT（EH010）
• HUMAN G-CSF ELISA KIT（EH011）
• HUMAN GM-CSF ELISA KIT（EH012）
• HUMAN sICAM-1 ELISA KIT（EH013）
• HUMAN Leptin ELISA KIT（EH014）
• HUMAN VEGF ELISA KIT（EH015）
• HUMAN EGF ELISA KIT（EH016）
• HUMAN IL-1α ELISA KIT（EH017）
• HUMAN IL-2 sRα ELISA KIT（EH018）
• HUMAN MCP-1 ELISA KIT（EH019）
• HUMAN MMP-9 ELISA KIT（EH020）
• HUMAN Adiponectin ELISA KIT（EH041）
• HUMAN VCAM-1 ELISA KIT（EH042）
• HUMAN BDNF ELISA KIT（EH043）
• HUMAN IL-5 ELISA KIT（EH044）
• HUMAN HGF ELISA KIT（EH045）
• HUMAN Insulin ELISA KIT（EH046）
• HUMAN IL-18 ELISA KIT（EH047）
• HUMAN MMP-2 ELISA KIT（EH048）
• HUMAN IL-17R ELISA KIT（EH051）
• HUMAN ADAMTS1 ELISA KIT（EH052）
• HUMAN LIF ELISA KIT（EH053）
• HUMAN IL-7 ELISA KIT（EH054）
• HUMAN MIP-1α ELISA KIT（EH055）
• HUMAN β-NGF ELISA KIT（EH056）
• HUMAN IL-15 ELISA KIT（EH057）
• HUMAN IL-3 ELISA KIT（EH058）
• HUMAN IFN-α ELISA KIT（EH059）
• HUMAN DKK-1 ELISA KIT（EH060）
• HUMAN HIV-1 Gag p24 ELISA KIT（EH062）

Принцип действия на примере набора HUMAN TNF-α ELISA KIT（EH009）

В данном анализе используется сэндвич ИФА с двумя антителами. Моноклональное a TNF-α антитело инкапсулируется на планшет ELISA. TNF-α в образце и стандарте связывается с моноклональным антителом, образуя иммунный комплекс, а свободные компоненты смываются.

Далее добавляется биотинилированное античеловеческое TNF-α антитело, которое связывается с TNF-α в стандарте или образце на планшете ELISA, образуя иммунный комплекс. Свободные компоненты вновь смываются.

Затем добавляется меченный пероксидазой хрена стрептавидин, который специфически связывается с биотином, и свободный компонент вымывается. Добавляется хромогенный субстрат, и если в реакционных лунках присутствует TNF-α, пероксидаза хрена вызывает окрашивание субстрата: из бесцветного в синий, а затем, после добавления стоп-реактива — в жёлтый.

Значение оптической плотности (OD) измеряется при 450 нм. Существует положительная корреляция между концентрацией TNF-α и значением OD450. Концентрация TNF-α в образце определяется построением стандартной кривой.